胡椒碱脂质体的制备及对于胃癌细胞体外抗肿瘤活性的作用研究

摘要

目的:研究胡椒碱脂质体的制备方法及胡椒碱脂质体体外抗胃癌细胞活性及作用机制。方法:利用旋转薄膜冻融法制备胡椒碱脂质体,采用透射电镜(TEM)观察脂质体的形态,粒径分析仪和Zeta电位测定仪分析胡椒碱脂质体的粒径和Zeta电位,进行脂质体的稳定性实验、体外释药特性考察。体外培养人胃肿瘤MKN45细胞,分为正常组、对照组、实验组,对照组使用50μmol/L的胡椒碱干预,实验组使用等剂量的胡椒碱脂质体干预。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达水平,Hoechst 33342染色观察细胞染色。结果:胡椒碱脂质体形态为类球状,平均粒径为(92. 32±2. 10) nm,Zeta电位为(-49. 8±3. 5) m V,体外释药实验显示胡椒碱脂质体释药速率显著高于胡椒碱原料药;细胞实验结果显示,对照组和实验组细胞活力相比正常组显著降低,具有时间依赖性(P <0. 05),而实验组相比对照组具有统计学意义(P <0. 05);流式细胞术检测,对照组和实验组细胞凋亡率高于正常组,而实验组显著高于对照组(P <0. 05);对照组和实验组中Bcl-2水平显著下调,而Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达显著上调,与正常组比较,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:胡椒碱脂质体释药速率高于原料药,说明脂质体对于胡椒碱起到了增溶作用,而胡椒碱脂质体体外诱导MKN45凋亡能力高于原料药。