二乙氧基乙醇诱导大鼠生精细胞凋亡及其分子机制研究

摘要

目的　观察二乙氧基乙醇 (2 - EE)诱导大鼠生精细胞凋亡及Bcl- 2家族、Fas系统和Caspase -3与细胞凋亡过程的作用 ,探讨 2- EE诱导大鼠生精细胞凋亡的分子调控机制。方法　选用SD大鼠 (8只 ,分 3个实验组和 1个对照组 ,每组 2只 )以 80 0mg kg剂量分别灌胃 1、3和 5d。提取一侧睾丸组织DNA用于DNA片段分析 ,另一侧睾丸组织RNA用于半定量RT -PCR分析Bax、Bcl -2、Fas、Fas L和Caspase- 3基因mRNA水平变化。用QuantityOne 4 1 1软件定量各条带亮度 ,以GAPDHRT- PCR定量结果为内对照得出各个基因mRNA相对定量值。结果　 2 EE染毒后第 1天 ,大鼠睾丸细胞DNA片段出现明显的“DNALadder”。RT- PCR电泳结果结合QuantityOne 4 1 1定量结果显示 :Bax与FasmRNA水平在染毒后每天均升高 ,以第 3天最为显著 ,并且Bax与Bcl- 2mRNA水平的比值也在染毒后上升。结论　二乙氧基乙醇可以诱导生精细胞凋亡 ,其分子途径可能与Bax家族和Fas系统有关。