SRPX2通过巨噬细胞促进人脐静脉内皮细胞血管生成能力的作用

摘要

目的:探究含sushi重复蛋白X连锁2蛋白(sushi repeat-containing protein X-linked 2,SRPX2)是否可通过巨噬细胞对血管生成产生影响及其可能的机制。方法:用shRNA-SRPX2及shRNA空载体转染HCT116细胞,并收集以上两种细胞和空白HCT116的细胞培养基作条件培养基,用3种条件培养基作用于人源单核细胞(THP-1)诱导的巨噬细胞,而后巨噬细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养,并以Transwell迁移实验检测HUVEC迁移能力,以Matrigel基质胶管腔形成实验检测管腔形成能力。用Western blot检测巨噬细胞中局部黏着斑激酶(FAK)的表达水平。结果:在Transwell迁移实验中,HCT116敲降SRPX2基因的条件培养基与巨噬细胞作用,并与HUVEC共培养后,HUVEC迁移细胞数明显减少(P <0. 01)。而在Matrigel管腔形成实验中,HCT116敲降组形成的管腔的交叉点数、成网数、节点数也有所减少(P <0. 05)。FAK蛋白检测发现,SRPX2重组蛋白作用后的巨噬细胞总FAK表达量和FAK蛋白磷酸化水平有所增高。结论:SRPX2可能通过FAK相关通路影响巨噬细胞,进而间接影响血管内皮细胞的血管生成能力。