抗CD59单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

本实验应用杂交瘤技术，首次在国内建立了两株抗人补体终未阶段同源限制因子（ＨＲＦ）的杂交瘤细胞系（２Ａ７和１Ｆ１０）。经抗原特异性及功能分析提示它们所针对的抗体分子具有相似的功能，但抗原性和分子量不同：２Ａ７－Ａｇ为１８～２２ＫＤａ，１Ｆ１０－Ａｇ为６５ＫＤａ。进一步应用免疫荧光流式细胞分析、促同源补体溶血试验、中和实验、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ、ＰＩ－ＰＬＣ处理等实验手段系统地鉴定了２Ａ７抗原的细胞分布、抗原特异性、分子特性及功能。表明２Ａ７与ＣＤ５９的命名抗体ＭＥＭ４３和１Ｆ５共同识别同一膜糖蛋白分子，该分子以糖脂链（ＧＰＩ）锚固于细胞膜上，证明２Ａ７为一株抗ＣＤ５９的单克隆抗体。