表达重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的大肠杆菌工程菌的高密度培养

摘要

采用溶氧反馈的分批培养流加补料的方法高密度培养重组大肠杆菌BL21（DE3）生产重组葡激酶．水蛭素融合蛋白。通过摇瓶培养对菌种和培养条件的初步筛选，采用溶氧反馈的流加补料策略，进行了5L发酵罐的合成培养基和复合培养基的发酵工艺研究。通过对培养条件的不断优化，重组葡激酶．水蛭素融合蛋白在大肠杆菌BL21（DE3）里得到了高效表达，菌体密度最终达到115g／L（WCW）以上，可溶性重组融合蛋白占菌体总蛋白的30％以上，含量约为1．1～1．2g／L。5L发酵罐的发酵工艺参数在40L发酵罐中进行了放大培养，结果表明该工艺能有效地放大，可适用于工业生产。