差速贴壁法体外培养人脐血内皮祖细胞的实验研究

摘要

目的建立一种经济可靠、稳定、高纯度内皮祖细胞的培养方法。方法采用 Ficoll 密度梯度离心法从人脐血中分离单个核细胞,于包被人纤连蛋白的培养皿中贴壁培养,收集48 h后的悬浮细胞重新贴壁培养至第7天,利用免疫组化、免疫荧光及流式细胞术对培养的细胞进行鉴定。结果培养的细胞呈短梭形、多角型、胞体小;可见到大量典型的内皮祖细胞克隆;vWF 和 flk-1免疫组化细胞阳性率>95%,免疫荧光 Dil-ac-LDL 和 FITC-UEA-1双染阳性的细胞阳性率>98%,流式分析 CD_(133)^+细胞的百分率为(7.0±1.8)%。结论差速贴壁法是一种经济可靠、稳定、高纯度内皮祖细胞的培养方法。