多重PCR方法快速检测E.coli O_(157)毒力及rfbEO_(157)基因

摘要

〔目的〕探索一种快速、特异的检测大肠埃希菌O1 57的多重PCR(multiplexPCR)方法。〔方法〕选用针对大肠埃希菌O1 57志贺样毒素 1、2 (stx1、stx2 )基因、溶血素 (hlyA)基因、粘附抹平因子 (eae)基因和O1 57特异性基因 (rfbEO1 57)的 5对引物 ,在同一扩增体系中进行PCR ,检测 9株不同来源的O1 57和其他大肠埃希菌 2 1株。〔结果〕通过优化多重PCR反应条件和循环参数 ,5对特异性引物只扩增相应的基因片段 ,检测结果与应用常规PCR获得的结果一致。〔结论〕该多重PCR方法能够在一次扩增中同时反应待测菌株是否为大肠埃希菌O1 57及其携带毒力基因的情况 ,可为大肠埃希菌O1 57的诊断及流行病学调查提供一种简便、经济、快速的检测手段。