荧光探针法测定原代培养家兔肾脏内髓集合管细胞内pH

摘要

目的：建立稳定的原代培养肾脏内髓集合管（ Ｉｎｎｅｒ ｍ ｅｄｕｌｌａｒｙ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｄｕｃｔ， Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ）细胞的ｐ Ｈｉ测定方法，为进一步研究 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞功能奠定基础。方法：将家兔肾脏 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞用盖玻片培养成细胞单层，制备 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞ｐ Ｈｉ标准曲线，然后测定 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的 Ｂ Ｃ Ｅ Ｃ Ｆ／ Ａ Ｍ 的荧光强度比值（ Ｆ Ｉ Ｒ），进而将 Ｆ Ｉ Ｒ转换为 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的ｐ Ｈｉ。结果：本实验观察到 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的 Ｆ Ｉ Ｒ在ｐ Ｈ ６．８～７．８ 范围内呈显著正相关，回归方程为 Ｙ＝ ０．８４８±１．０８９ Ｘ（ｒ＝ ０．９８８， Ｐ ＜ ０．０１）。１５ 份标本的ｐ Ｈｉ结果为７．２５５±０．０３０，与 Ｍａｎｋｕｓ等报告的结果最接近。结论：以上结果表明 Ｂ Ｃ Ｅ Ｃ Ｆ／ Ａ Ｍ 荧光探针法测定 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的ｐ Ｈｉ，具有简单、可靠、经济等优点， Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞ｐ Ｈｉ测定是研究 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞功能的基础测定之一。