食管癌相关基因4在体外纯化培养大鼠脉络丛上皮细胞中的表达研究

摘要

目的:研究食管癌相关基因4(esopageal cancer related gene 4,ECRG4)在体外培养条件下大鼠脉络丛上皮细胞(choroid plexus epithelial cells,CPECs)中表达的情况。方法 :分离纯化培养新生1 d斯泼累格·多雷大鼠(Sprague-Dawley rats,SD Rats)CPECs,并进行传代培养,分为原代培养组(A组)、传1代培养组(B组)和传2代培养组(C组)、原代培养干预组(D组,使用氯化锰给予毒化),并应用qRT-PCR法、Western blot法及ELISA法分别检测ECRG4在各组CPECs中的表达情况。结果:①qRT-PCR法检测ECRG4 mRNA在原代培养和传代培养的CPECs中的表达:B组ECRG4 mRNA表达高于A、C 2组,差异具有统计学意义(P=0.000),A、C 2组差异无统计学意义(P=0.127)。D组与A组比较表达明显降低,差异有统计学意义(P=0.001)。②Western blot法ECRG4蛋白在原代培养和传代培养的CPECs中的表达:B组ECRG4蛋白表达水平明显高于A组及C组,C组ECRG4蛋白表达水平明显高于A组,差异具有统计学意义(P=0.000)。A组ECRG4蛋白表达水平明显高于D组,A、D 2组ECRG4蛋白表达水平的差异具有统计学意义(P=0.000)。③ELISA方法检测ECRG4在原代培养和传代培养的CPECs中的分泌情况:B组高于A、C 2组,A组高于C组,差异具有统计学意义(P=0.000)。而A、B 2组差异无统计学意义(P=0.131)。结论:通过对ECRG4在CPECs中的表达研究,提示ECRG4可能参与CPECs对损伤的反应,并影响了CPECs的生物学特性,为ECRG4在神经再生中的作用研究奠定理论和实验基础。