抗P-选择素功能域单抗抗黏附及对人肾小管上皮细胞黏附共刺激分子的抑制作用

摘要

目的本研究旨在观察自制的抗P -选择素Lectin-EGF功能域单抗 (PsL-EGFmAb)对中性粒细胞与内皮细胞黏附的影响 ,以及对人肾小管上皮细胞黏附共刺激分子 (P -选择素和CD80)表达的抑制作用。方法①常规培养或制备人脐静脉内皮细胞 (ECV -304)、中性粒细胞 ,并对ECV -304行炎症因子TNF-α刺激 ,然后观察和比较经PsL-EGFmAb以及抗P -选择素全长单抗 (PsmAb)和配体拮抗剂N -去硫酸肝素处理前后 ,中性粒细胞与ECV -304细胞黏附变化 ;②常规培养人肾小管上皮细胞 (HK2细胞 )并制备细胞爬片 ,通过细胞免疫荧光法 ,检测TNF -α刺激后HK2细胞P-选择素表达 ,且通过RT -PCR观察相同处理后HK2细胞共刺激分子CD80表达情况。此外 ,观察三种药物对P -选择素和CD80表达的影响。结果①TNF -α刺激后内皮细胞与中性粒细胞黏附量明显增高 (P<0.01) ,而PsL -EGFmAb、PsmAb及N -去硫酸肝素三种药物处理组的细胞黏附量均降低 (均P<0.05) ,且干预效果均随药物浓度的增高而增强。此外在相同浓度下 ,黏附抑制效应以PsL -EGFmAb为甚 ,PsmAb次之 ,N -去硫酸肝素再次之 (均P<0.05)。②HK2细胞在正常培养条件下 ,基本不表达P-选择素 ,受TNF -α刺激后 ,可明显表达P -选择素。但经三种药物处理后 ,HK2细胞的P -选择素表达受到抑制 ,其中?