改良脑灌注固定方法在组织透明技术中的效果评估

摘要

组织透明技术能够在不破坏组织整体结构的前提下观察其内部的三维结构信息,目前常用的方法有多种,但在操作复杂性、荧光兼容性以及组织形变等方面各有优缺点,因此开发新型透明技术势在必行。在长期试验中我们发现组织灌注固定的充分性在组织透明中非常重要,本文以优化组织透明效果为出发点,采用改进的双侧颈总动脉灌注技术灌注固定大鼠和兔脑组织,进行HE染色和免疫荧光试验,然后对剩余部分脑组织切片进行透明处理,检测透光率。结果显示,与传统经心脏灌注技术相比,双侧颈总动脉灌注技术需要的灌注液和固定液可节省50%以上;脑组织切片透光率更高,近红外波长区域检测结果经统计分析,具有显著性差异(P<0.05);同时,与传统灌注技术相比,脑组织HE染色和免疫荧光效果也较好,红细胞数量显著减少(P<0.05),组织灌注固定更充分。