银杏胞质抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)克隆及表达特性分析(英文)

摘要

【目的】分离和克隆银杏细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因GbAPX1(GenBank登录号为FJ555021),了解其在银杏正常组织发育以及响应环境胁迫和逆境相关激素诱导的表达情况。【方法】利用同源克隆及RACE技术从银杏叶片细胞质中分离得到GbAPX1全长cDNA序列,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推测的氨基酸序列进行分析,并用实时定量PCR方法研究GbAPX1在不同组织、不同激素和胁迫处理下的表达模式。【结果】克隆GbAPX1基因全长cDNA序列为965 bp,包含一个759 bp的最大读码框,编码252个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为27.6 kDa,其等电点为5.81。系统进化树分析表明,GbAPX1和其他裸子植物同源性较高并聚为一类。qRT-PCR分析结果显示,GbAPX1表达具有组织和发育时期差异性,在成熟叶片和雄蕊中具有最高表达水平,在茎和嫩叶中表达水平较低。诱导表达分析表明,GbAPX1受到激素和环境压力诱导。其中,脱落酸、水杨酸、茉莉酸甲酯和紫外辐射均能诱导其转录上升,而乙烯利和伤害处理对GbAPX1转录水平无显著影响。【结论】确认获得序列为GbAPX1基因cDNA序列;GbAPX1不仅参与了银杏正常的组织生长发育,还与一些环境胁迫和逆境相关激素诱导表达有关。