体外瞬时转染野生型PTEN过表达对乳腺癌MCF-7细胞的影响

摘要

目的:研究野生型PTEN基因过表达对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法:应用携带野生型PTEN的真核表达载体pEGFP-C1-PTEN,以脂质体介导的方法体外瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞, 利用流式细胞术检测抗凋亡蛋白bcl-2的表达,通过相差显微镜、细胞生长曲线、MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳等方法,观察PTEN基因过表达对MCF-7细胞生物学特性的影响。结果:荧光显微镜观察、免疫细胞化学和RT-PCR检测证实,转染后MCF-7细胞中PTEN呈高水平表达;相差显微镜观察到MCF-7/PTEN 细胞出现典型的凋亡形态学改变;细胞生长曲线低平;流式细胞检测显示,G1期细胞比例比空载体组增加14.79%,并出现凋亡峰;DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带;同时还检测到转染PTEN后细胞bcl-2 表达下降。结论:外源性PTEN基因过表达可显著抑制MCF-7细胞的周期进程并诱导细胞凋亡。