生物素标记GFV－cDNA探针的制备及在检测葡萄扇叶病毒上的应用

摘要

以整合到质粒中的ＧＦＶ－ｃＤＮＡ为模板经ＰＣＲ合成了生物素标记的ＧＦＶ单、双链探针。用合成的探针对提纯的ｃＦＶ－ＲＮＡ＿２、感染ＣＦＶ的昆诺藜叶及１８株而萄进行ＤＮＡ－ＲＮＡ杂交检测表明：检测提纯病毒ＲＮＡ＿２的灵敏度为１．５ｐｇ／斑点，感染ＧＦＶ的昆诺藜提取液最高稀释度可达４０９６０倍；１１株显示典型扇叶症状的样品杂交结果均为阳性，且汁液稀释４００～８００倍仍能测出，７株不显示典型扇叶症状的葡萄中３株受到ＧＦＶ的侵染。单、双链探针最适使用浓度分别为１／２００及１／１００。