改良乙醇脱氢酶法测定血清中微量乙醇

摘要

目的:建立一个简便、灵敏、特异、试剂稳定的乙醇脱氢酶法检测血清中微量乙醇浓度。方法:选择Tris-HC l缓冲液作为乙醇脱氢酶法测定乙醇的反应条件,通过优化反应体系及自动生化分析仪分析参数,采用两点终点法对乙醇进行检测并评价了方法学性能。结果:乙醇脱氢酶(ADH)最适用量为1.2 g/L,氧化型辅酶I(NAD+)最适浓度为9 g/L。线性范围可达1200 mg/L,批内变异系数(CV)小于2.8%,批间变异系数(CV)小于3.9%,平均回收率为99.8%。本法(Y)与气相色谱法(X)比较,具有良好的相关性,Y=0.993X-9.76,r=0.998。胆红素159.1μmol/L、甘油三酯7.4 mmol/L、血红蛋白11.6 g/L、乙醛0.3 g/L、异丙醇0.2 g/L、甲醇0.7 g/L、甲醛0.6 g/L以下对本法测定乙醇结果无明显干扰。结论:本法测定血清中乙醇无需除蛋白,具有快速、简便、灵敏、特异等优点,适合于自动生化分析仪检测。