基于TGFβ/Smads信号通路探讨补肾促排卵汤治疗PCOS大鼠卵巢纤维化的分子机制

摘要

[目的]探讨补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的治疗效果,并研究其调节卵巢纤维化TGF-β/Smads信号通路的分子机制。[方法]将40只SD雌性大鼠随机分为空白组8只及脱氢表雄酮(DHEA)给药组32只,DHEA给药组每日颈部皮下注射DHEA(60 mg/kg),连续给药35 d;将造模成功的大鼠随机分为模型组、补肾促排卵汤低、中、高剂量组(5.58、11.16、22.32 g/kg)。补肾促排卵汤分别用生理盐水配成适当浓度,连续灌胃给药4周,每日1次;同时空白组与模型组大鼠予等量生理盐水进行灌胃。阴道涂片观察大鼠动情周期,HE法观察补肾促排卵汤对各组大鼠卵巢中卵泡发育的影响,天狼猩红染色法观察大鼠卵巢纤维化情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血清雌二醇(E2)、睾丸酮(T)、黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7 mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠TGF-β1、p-Smad3、Smad7的蛋白表达。[结果]与空白组比较,模型组大鼠丧失规律的动情周期,大鼠卵巢中囊状扩张卵泡增多,卵巢纤维化阳性面积明显增多,血清T、LH水平显著升高,同时TGF-β1、p-Smad3蛋白及mRNA表达显著增多,Smad7蛋白及mRNA表达显著减少(P<0.01)。与模型组比较,补肾促排卵汤中、高剂量组可明显改善大鼠的动情周期,减少囊状扩张卵泡的形成,降低卵巢纤维化阳性面积(P<0.01),下调卵巢TGF-β1蛋白及mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),显著下调p-Smad3蛋白及mRNA的表达(P<0.01),上调Smad7蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。[结论]补肾促排卵汤能有效治疗PCOS模型大鼠,可能是通过调节纤维化TGF-β/Smads信号通路上重要分子TGF-β1、p-Smad3、Smad7的表达从而发挥作用。