多基因PCR检测产毒性大肠杆菌和志贺氏菌的研究

摘要

为了提高普通的单基因ＰＣＲ检测致病性肠道杆菌的时效，采用ＥＴＥＣ４４８１３（ＬＴ）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴ）和福氏２ａＴ３２（ｉｐａＨ）３个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌（ＬＴ，ＳＴ）和志贺氏菌的三基因ＰＣＲ方法。并分别用相应单基因ＰＣＲ方法标记的探针斑点杂交标准株ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ）、工程株ＰＳＬＭ００４（ＳＴ）和标准株４８０２５１１（ｉｐａＨ）。杂交的结果都是阳性，证实了这个多基因ＰＣＲ扩增是特异的。并用此三基因ＰＣＲ反应系统检测１１３株ＥＴＥＣ和志贺氏菌，结果是ＬＴ２５株、ＳＴ１６株、ＬＴ和ＳＴ共３０株及ｉｐａＨ４２株。在几种病原体可能共存的样本中，用一次ＰＣＲ就能解决病原体的检测和鉴别问题，比单基因ＰＣＲ更快速、经济。