苏云金芽孢杆菌杀蚊蛋白基因cry11 Aa的克隆与表达

摘要

目的克隆苏云金芽孢杆菌以色列亚种的杀蚊毒素蛋白基因cry11Aa,并使其在酵母双杂交系统受体菌Saccharomyces cerevisiaeL40中获得表达。方法应用聚合酶链反应扩增获得cry11Aa基因,构建表达载体pHybLex/Zeo-cry11Aa,转化到酵母菌Saccharomyces cerevisiaeL40。结果用Cry11Aa抗体和LexA抗体进行的Western blot免疫杂交表明cry11Aa基因在酵母菌L40中成功表达,生成了Cry11Aa-LexA融合蛋白。结论成功地克隆、表达了cry11Aa基因,为进一步利用酵母双杂交系统寻找与毒素蛋白Cry11Aa特异性结合的蚊幼中肠受体蛋白,揭示苏云金芽孢杆菌毒杀蚊虫的分子生物学机制奠定了基础。