苏云金芽孢杆菌以色列亚种130kd杀蚊蛋白基因的...

摘要

以人工合成的130kd 杀虫蛋白基因的18-base 序列为探针,通过 Southern 分子杂交,验证了在 Bacillus thuringiensis var.israelensis 4Q5菌株75Md 质粒上含有130kd 杀蚊蛋白基因,并且证明了提纯的晶体蛋白具有杀蚊幼虫活性。对该质粒进行 HindⅢ完全酶切,以pUC18为载体,以 E.coli TG1为受体,得到四个与探针有强杂交信号的阳性克隆,其中两个(pFH2,pFH4)含有5.2kb HindⅢ插入片段,包含第一类130kd 杀蚊蛋白基因;另两个(pFH1,pFH3)含有2.3kb HindⅢ插入片段,包含第二类130kd 杀蚊蛋白基因的3′部分.pFH2和 pFH4中,第一类130kd 杀蚊基因的插入方位不同。