Bispora sp. MEY-1来源嗜酸果胶甲酯酶性质分析及其应用研究

摘要

食品加工副产物富含果胶类物质,果胶酶可以将其降解为果胶低聚糖,不仅可以有效控制果胶低聚糖的聚合度及结构,还能实现食品加工副产物废弃资源的再利用,创造新的经济效益。从嗜酸真菌Bispora sp. MEY-1克隆获得一个碳水化合物第8家族的果胶甲酯酶基因Pem8A,将其连接到表达载体pPIC9上,在毕赤酵母GS115中实现高效异源表达。对纯化后的重组蛋白PME8A的酶学性质进行测定,发现其最适温度为60℃,在55~80℃可保持80%以上的酶活;最适pH为3.5,在pH 2.5~5.0范围内维持50%以上的酶活,是真菌来源中少数的嗜酸果胶甲酯酶。用PME8A处理苹果渣、橘皮果胶粗提物后,去甲基化效果明显,使得Achaetomium sp. Xz8来源的内切多聚半乳糖醛酸酶PG8fn酶活分别提高了8.5倍和1倍,表现出很好的协同效应。研究证明果胶甲酯酶PME8A可以应用于从食品加工副产物生产果胶寡糖,为果胶低聚糖的获取提供了新的方法。