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IL-4/IL-13诱导小鼠支气管上皮细胞中IL-13Rα2基因转录的调节

     

摘要

目的 了解支气管哮喘发病中白细胞介素 13受体α2 (IL 13Rα2 )基因转录的调节作用。方法 采用PCR扩增hIL 13Rα2基因启动子区不同长度的基因片段F1~F6 ,其中F1和F2含有信号转导子和转录活化子 6 (STAT6 )的结合区域。将F1~F6连入载体pGEM Teasy中 ,转化 ,获得菌落 ,经鉴定后将pGEM Teasy构建体的插入部分F1~F6连入增强载体pGL3中 ,转化 ,获得菌落 ,再以pGL3构建体 (F1~F6 ,mock)转染入小鼠支气管上皮细胞TGMBE 0 2 3。转染 2 4h后 ,给予小鼠IL 4 (mIL 4 ,10 μg/L)和小鼠IL 13(mIL 13,5 0 μg/L)处理 ,2 4h后进行荧光分析。 结果  (1)基因组DNA(编号BCI0 0 1)IL 13Rα2启动子区的碱基序列与GeneBank中登录的序列完全一致。 (2 )各构建体转染后 ,对照组与mIL 4或mIL 13刺激组的相对荧光活性无显著差异 (P均 >0 .0 5 )。结论 IL 4、IL 13的刺激不影响hIL 13Rα2基因的转录活性。

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