兔受精卵显微注射外源基因后体外培养的卵裂发育

摘要

从超数排卵的１４只母兔获得４３８枚受精卵，卵龄１６～２２小时．显微操作在带微分干涉和相差的Ｎｉｋｏｎ倒置显微镜下进行．注射针的尖端外也０．５μｍ，离尖端４０和８０μｍ处的外径分别为４．２和６．５μｍ．注射用外源基因是绵羊生长激素基因与ＭＴ－１启动基因藕连的线状ＤＮＡ溶液（１ｎｇ／μｌ）．１４０枚注射的受精卵和未注射的１４５枚受精卵（对照），在Ｈａｍ’ｓＦ—１０培养液（补充生长因子）中培养（３８℃，５％的ＣＯ２）．结果，培养４８小时后，注射组卵裂发育率分别是：未卵裂７．９％（１１／１４０）、卵裂至２～４细胞期１１．０％（１６／１４０）、卵裂至８～１６细胞期８０．７％（１１３／１４０）．对照组相应的卵裂率分别是４．１％（６／１４５）、１２．４％（１８／１４５）和８３．４％（１２１／１４５）．两组卵裂发育率相近．本实验的显微操作对注射后卵的发育没有产生明显的伤害影响．