A型流感病毒核蛋白噬菌体单链抗体的原核表达

摘要

目的 从构建的A型流感病毒核蛋白(Nucleoprotein)噬菌体单链抗体库中筛选阳性克隆,在大肠杆菌HB2151中表达流感病毒核蛋白噬菌体单链抗体,为研制A型流感病毒免疫渗漏试剂盒建立基础。 方法 经过连续三轮固相"亲和-洗脱-富集"筛选,丰富噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,采用ELISA和SDS-PAGE方法对大肠杆菌培养上清液和细菌周质腔蛋白进行分析目的产物。 结果 随着淘洗轮数的增加,NP抗原特异性的噬菌体抗体得到了高度富集,每轮淘洗可以增加10倍左右的特异性的噬菌体抗体;从96个克隆中筛选到10个阳性克隆,其中三个阳性信号较强,分别为A1、E1和G3。其OD450nm分别达到0.469、0.582和0.507。 结论 利用噬菌体抗体库技术,初步在大肠杆菌中表达了A型流感病毒噬体单链抗体。