应用cDNA微阵列技术筛选大鼠脊髓损伤修复相关基因(英文)

摘要

脊髓损伤是一类常见的、高致残率的中枢神经系统疾病,由于多种复杂因素影响其损伤后的修复过程,损伤脊髓的再生能力非常有限。本研究采用cDNA微阵列技术筛选大鼠脊髓损伤后出现的差异表达基因。实验组动物在T8-T9进行脊髓全横断手术,对照组动物只打开椎板;4．5 d后取脊髓进行RNA提取并在反转录过程中进行Cy3／Cy5标记,然后与预制的、带有4041条特异性探针的芯片进行杂交。Cy5／Cy3信号比值≥2．0视为脊髓损伤后出现差异表达的基因。通过筛选,我们得到了65个上调表达基因(21个己知基因,30个已知EST和14个未知基因)和79个下调基因(20个已知基因,42个已知EST 和17个未知基因)。进一步通过半定量RT-PCR对其中的5个上调已知基因(Timpl,Tagln,Vim,Fc gamma receptor,Ctss)和三个下调已知基因(stearyl-CoA desaturase,F2,Ensa)的表达情况进行了验证,结果显示与芯片结果一致。这些基因可能在脊髓损伤后的修复过程中起一定的作用,对其深入研究将有助于揭示脊髓损伤修复的分子机制。