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疏水化阳离子透明质酸胶束介导的siRNA转染影响因素及细胞靶向性研究

         

摘要

研究疏水化阳离子透明质酸胶束HAPL9600介导基因转染的影响因素。通过测定HAPL9600胶束与siRNA形成复合物的粒径,分别考察透明质酸相对分子质量、HAPL9600浓度、HAPL9600与siRNA比例、pH、介质、孵育时间以及血清对疏水化阳离子透明质酸胶束体外转染效率的影响,筛选较优的转染条件。同时进行受体抑制实验,考察该载体的细胞靶向性。结果表明当透明质酸相对分子质量为9 600、载体与siRNA质量比为8,孵育时间为30 min、体系中HAPL9600浓度为15 mg/mL,转染介质为pH 6.8的PBS溶液时转染效率较高。游离透明质酸可抑制经CD44介导的siRNA的转染效率。HAPL9600可作为合成新型靶向非病毒载体的骨架,但必须控制有关因素才能得到可重复的最佳转染结果。

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