EGF中介的NF-_κB及细胞外基质降解酶与胆管癌细胞侵袭相关性

摘要

目的:探讨表皮生长因子(EGF)诱导胆管癌细胞侵袭力的相关机制.方法:检测胆管癌细胞株HuCCT1在EGF不同浓度下的细胞侵袭力及细胞增殖情况;采用RT-PCR及Westernblot分析方法,检测基质金属蛋白酶(MMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)在不同EGF浓度下的基因和蛋白表达;采用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测核转录因子(nuclearfactorkappaB,NF-κB)在不同EGF浓度下的活性;并用NF-κB的抑制剂PDTC和布洛芬(ibuprofen)预先处理HuCCT1胆管癌细胞后,检测其对HuCCT1胆管癌细胞侵袭力的影响.结果:随着EGF浓度的增加,胆管癌细胞株HuCCT1侵袭细胞数也随之增加,具有明显的浓度依赖性(EGF10,100μg/Lvs0μg/L:35.4±6.2vs16.3±3.1,t=4.77,P=0.009;57.2±7.6vs16.3±3.1,t=8.63,P=0.001),而EGF浓度的变化对HuCCT1细胞的增殖无明显影响.EGF明显上调HuCCT1细胞中MMP-9、uPA和PAI-1的mRNA和蛋白表达水平,MMP-2不受影响.随着EGF浓度的增加,NF-κB的活化明显增强;PDTC和布洛芬明显抑制EGF诱导的HuCCT1细胞侵袭力(46.6±4.6vs62.3±5.2,t=3.168,P=0.037;35.3±5.4vs62.3±5.2,t=6.30,P=0.003).结论:EGF能够增强胆管癌细胞的侵袭力,其增强的侵袭力可能是通过NF-κB信号传导路径,激活MMP-9,uPA和PAI-1等蛋白水解酶而实现的.