融合表达IL-2和EGFP逆转录病毒载体的构建

摘要

目的构建融合表达IL-2和EGFP报告基因的逆转录病毒载体。方法设计载体pRevTet-On和pEGFP-C1的接头序列,经酶切连接重组为过渡载体pRevEGFP-C1,同时对质粒pBV220-IL-2和pEGFP-C1进行酶切,连接重组为过渡载体pEGFP-C1-IL-2。分别酶切质粒pRevEGFP-C1和pEGFP-C1-IL-2,琼脂糖凝胶电泳回收目的片段IL-2,并将其连接到pRevEGFP-C1的多克隆位点(MCS)中,转化至E.coliDH5α进行扩增,提取质粒DNA获得重组体pRevEGFP-C1-IL-2。结果经分析鉴定,所构建的重组载体pRevEGFP-C1-IL-2完全正确。结论已成功地构建了融合表达IL-2和EGFP的逆转录病毒载体pRevEG-FP-C1-IL-2。