金雀异黄素调节肝癌HepG2细胞bax基因表达诱导细胞凋亡的实验研究

摘要

目的探讨三磷酸肌醇(IP3)和bax基因表达变化在金雀异黄素(genistein,Gen)诱导肝癌细胞凋亡中的作用。方法以0μmol/L Gen作用肝癌HepG2细胞72 h为对照组,以不同浓度(20、40、60及80μmol/L)Gen为浓度依赖性实验;以60μmol/L Gen作用于肝癌HepG2细胞0 h为对照组,60μmol/L Gen作用于HepG2细胞不同时相(6、12、24、48及72 h)为时间依赖性实验;应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量;RT-PCR分析baxmRNA表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果不同浓度(20、40、60及80μmol/L)的Gen作用于肝癌HepG2细胞72 h后,IP3含量显著低于对照组〔(17.7±1.3)、(11.2±0.9)、(4.9±0.5)、(4.8±0.3)pmol/106cells vs(29.4±0.5)pmol/106cells〕,P<0.01;bax mRNA表达(RI,灰度与面积之积的相对强度)显著高于对照组(0.26±0.02、0.33±0.05、0.35±0.06、0.38±0.05 vs 0.09±0.01),P<0.01;细胞凋亡率也显著高于对照组〔(10.1±0.9)%、(18.7±1.6)%、(28.7±2.5)%、(27.9±2.0)%vs(2.6±0.1)%〕,P<0.01。60μmol/L Gen作用于肝癌HepG2细胞不同时相(6、12、24、48及72 h)后,各时相IP3含量显著低于对照组〔(22.6±0.9)、(12.0±1.4)、(7.5±0.8)、(5.6±0.5)、(4.3±0.6)pmol/106cells vs(29.2±0.6)pmol/106cells〕,P<0.01;12 h后baxmRNA表达显著高于对照组(0.25±0.06、0.29±0.02、0.30±0.02、0.35±0.04 vs 0.09±0.01),P<0.01;24 h后各时相细胞凋亡率明显高于对照组〔(7.4±0.5)%、(20.5±2.0)%、(30.7±1.6)%vs(2.6±0.1)%〕,P<0.01。结论Gen能减少IP3生成,上调bax基因表达,诱导肝癌细胞凋亡。