雌激素受体亚型α对子宫内膜癌细胞HEC-1B侵袭能力调控的研究

摘要

目的:特异性下调子宫内膜癌细胞中的ERα基因,探讨ERα亚型表达在子宫内膜癌侵袭中的作用。方法:将ERα的小干扰RNA(siRNA-small interfering RNA)转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,通过RT-PCR和Western blot证实ERα基因的有效阻断。通过transwell小室法检测下调ERα基因表达前后HEC-1B细胞的侵袭能力;应用RT-PCR检测转染前后细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达水平的变化;Western blot及明胶酶谱分别检测细胞分泌TIMP-1、TIMP-2、MMP-2和MMP-9蛋白的水平。结果:(1)将ERα-siRNA转染HEC-1B细胞后,转染效率大于90%,ERαmRNA及蛋白的表达水平均明显下调(分别为72%,67%);(2)下调ERα基因表达后,肿瘤细胞的侵袭能力下降(P<0.05);在mRNA水平和蛋白水平均可检测到ERα-siRNA组细胞的MMP-2、MMP-9表达下降(P<0.05),TIMP-1、TIMP-2表达增加(P<0.05)。结论:使用ERα-siRNA能够有效地阻断ERα基因表达;子宫内膜癌细胞中,17β-雌二醇对MMPs/TIMPs具有调节作用,这种作用可通过ERα介导;ERα表达水平影响子宫内膜癌细胞的侵袭能力。