Cyclin D1反义寡核苷酸对SGC7901胃癌细胞生长和化疗敏感性的影响

摘要

目的　研究 Cyclin D1反义寡核苷酸对胃癌细胞 SGC790 1生长和化疗敏感性的影响 ,并探讨其内在机制。方法　采用脂质体 lipofect AMINE2 0 0 0包裹硫代修饰的 Cyclin D1ASODN转染细胞 ,观察对 SGC790 1细胞的量效曲线及其生长曲线。 0 .2μmol/ L Cyclin D1ASODN转染细胞 2 4小时后 ,给予梯度浓度的 5 -氟尿嘧啶 (5 -FU )、氨甲喋呤 (MTX)、顺铂 (DDP) ,观察量效反应 ,计算 IC50 。应用 RT- PCR检测细胞转染后 2 4小时和 4 8小时时Cyclin D1、胸苷酸合成酶 (TS)、胸腺嘧啶磷酸化酶 (TP)、二氢叶酸还原酶 (DHFR) m RNA表达情况。结果　 CyclinD1ASODN对 SGC790 1细胞产生剂量依赖性的抑制效应 ,0 .2μm ol/ L Cyclin D1ASODN转染 2 4小时能显著抑制胃癌细胞生长 ,降低 Cyclin D1m RNA表达。 Cyclin D1ASODN增加了胃癌细胞对 5 - FU ,MTX,DDP的敏感性 ,ASODN +化疗组对各化疗药物的 IC50 均有显著下降。 RT- PCR显示 Cyclin D1ASODN转染后 2 4小时时 TS、DHFRm RNA表达较对照组下降 ,而 TPm RNA表达较对照组升高 ,4 8小时时 TS、TP、DHFR m RNA表达的改变更加明显。结论　 Cyclin D1ASODN能降低 Cyclin D1m RNA表达 ,抑制胃癌细胞 SGC790 1的生长 ,并通过改变5 - FU,MTX代谢相关酶的表达提高细胞对它们的?