胰腺生长因子促胰岛β细胞的生物活性研究

摘要

目的研究胰腺提取物中的胰腺生长因子对胰岛β细胞的增殖活性。方法常规培养胰岛β细胞RIN-m细胞株,按每孔1.0×104个细胞入96孔板,加药培养分别至24 h、48 h、72 h,按四甲基偶氮唑蓝比色法(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)和5-溴脱氧尿嘧啶(5-Bromo-2′-Deoxyuridine,Brdu)法检测细胞生长增殖情况,设阴性对照,以市售百密达(BEYATTA)为阳性对照;同时采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)荧光定量检测RIN-m细胞内的肠胰十二指肠同源盒1(pancreatic duodenal homeobox factor-1,PDX-1)和胰岛素(insulin,INS)基因的表达情况;收集培养48 h后的细胞,以流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果胰腺提取物中的胰腺生长因子能促进胰岛RIN-m细胞株的增殖,增殖率达40%以上(P<0.01),PDX-1和INS基因的同步高表达,均具有统计学差异(P<0.01)。实验组与对照组相比,细胞凋亡率降低。结论本胰腺提取物质(pancreatic extract,PE)有显著促进胰岛β细胞生长增殖、抑制其凋亡的作用,可作为糖尿病治疗新药开发重要依据。