人天然免疫分子Tetherin基因的克隆表达及其对流感病毒增殖的影响

摘要

目的:研究人天然免疫分子Tetherin的抗流感病毒作用。方法:从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆Tetherin基因并构建真核表达质粒,经限制性内切酶酶切及DNA测序鉴定后,脂质体转染法将Tetherin导入犬肾上皮细胞(MDCK),间接免疫荧光检测Tetherin细胞中的定位。利用流感病毒H1N1(PR8)病毒空斑形成实验检测Tetherin与流感病毒增殖的关系。结果:RT-PCR扩增出543 bp片段,成功克隆Tetherin;免疫荧光结果表明Tetherin定位于细胞膜。PR8空斑形成实验提示在转染与未转染Tetherin的MDCK中,病毒空斑没有明显形状大小或数量的区别。结论:Tetherin不能有效抑制流感病毒增殖。