膜-细胞骨架联接分子ezrin shRNA真核表达载体的构建

摘要

目的构建膜-细胞骨架联接分子(ezrin)特异的RNA干扰质粒载体。方法设计转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,与pSUPER质粒载体连接;将构建成功的特异性表达载体(pSUPER-ezrin)转染至人乳腺癌MCF-7细胞系,并应用RT-PCR和Western blot检测ezrin的表达。结果与MCF-7细胞和转染空白质粒pSUPER细胞相比,转染pSUPER-ezrin表达载体的MCF-7细胞ezrin mRNA和蛋白的表达明显降低。结论构建的ezrin特异性shRNA表达载体可有效地沉默ezrin基因,为进一步研究ezrin表达对乳腺癌转移的影响奠定了基础。