大鼠海马细胞质膜的分离及其蛋白质组学分析

摘要

运用差速离心和连续蔗糖密度梯度离心的方法分离纯化成年大鼠海马组织细胞质膜并用Western印迹对质膜样品进行检测.结果表明,在蔗糖密度梯度离心介质中,膜片主要集中于蔗糖浓度为32%～42%的区段(密度约1.13～1.18),其次是20%～25%(密度约1.08～1.10)的区段.39%(密度约1.17)层面上质膜浓度和纯度最高.一维SDSPAGE分离和CapLCMSMS分析后,通过数据库搜寻从大鼠海马组织细胞质膜样品中共鉴定出135种蛋白质,其中质膜蛋白和与膜相关的蛋白质共70种(占51.9%),主要包括Na+K+ATPase、谷氨酸天冬氨酸转运蛋白(glutamateaspartatetransporter)、亲脂素(lipophilin)、GLAST1a等.为研究海马组织细胞的功能和大鼠海马组织细胞质膜蛋白质数据库的建立积累了有价值的资料.