转sck基因水稻种子中外源蛋白含量的检测

摘要

目的　检测转sck基因水稻T6代种子中外源蛋白CpTI及HPT的表达量。方法　对转基因水稻种子进行PCR检测;取外源基因PCR检测阳性植株的叶、茎杆、根部、种子等不同部位对CpTI和HPT蛋白表达进行Westernblot分析,并对PCR检测阳性植株的种子进行双夹心ELISA检测,以同种非转基因水稻M86种子作对照。结果　在转sck基因水稻T6代种子中扩增出sck和hpt基因;Westernblot结果显示转基因水稻的叶片、茎杆和根部的蛋白出现特异的杂交条带,种子蛋白中未出现特异杂交条带。ELISA检测结果显示,转基因水稻种子中CpTI蛋白低于双夹心ELISA的检测低限(<14 μg L) ,HPT蛋白没有被检出。结论　转基因水稻种子中CpTI蛋白含量低于检测低限,不能被定量,并且不含有可检测水平的HPT蛋白。