大鼠成骨细胞系ROB-1的建立及氟对其DNA损伤的实验研究

摘要

目的 建立永生化大鼠成骨细胞系ROB-1并探讨氟对其DNA的损伤。方法 用酶消化法原代分离SD胎鼠颅骨成骨细胞,用Lipofect AMINE作载体对其转染SV40大T基因,并经PCR法鉴定大T基因整合情况。采用碱性磷酸酶染色法鉴定转染细胞系中成骨细胞的纯度;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)方法检测2.0～3.0mmol/L氟化钠染毒24h对成骨细胞DNA损伤情况。结果 转染后成骨细胞的基因组中整合有SV40T基因,碱性磷酸酶染色阳性细胞占95％以上;单细胞凝胶电泳发现NaF可不同程度地诱导细胞DNA链断裂,与溶剂对照组相比,各剂量组DNA断裂细胞百分率及其彗尾长度均有统计学意义的增加(P<0.05)。结论 建立了永生化大鼠成骨细胞系ROB-1;氟对成骨细胞DNA有损伤作用。