抗人精子表面蛋白P34H单克隆抗体的制备与鉴定

摘要

目的：制备并鉴定抗人精子表面蛋白P34H的单克隆抗体（McAb）。方法：以重组P34H蛋白作为抗原免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术建立分泌抗P34HMcAb的细胞株，并制备腹水型McAb，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western印迹鉴定其敏感性及特异性。结果：获得1株（2CA）IgGlKappa型抗P34HMcAb。ELISA结果表明腹水型McAb效价可达1：10^3～1：10^5，Western印迹显示该McAb既能特异性地结合精子膜蛋白中相对分子质量（Mr）约为34000的天然抗原，又能特异性地结合Mr约为27000重组P34H蛋白。结论：用上述方法成功制备抗P34HMcAb，为进一步研究P34H与男性生殖的关系奠定了基础。