绿色荧光蛋白标记的小鼠胚胎干细胞系的建立及向心肌细胞分化

摘要

目的 建立能够稳定表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的小鼠胚胎干细胞系，并诱导其向心肌细胞分化。方法 质粒pEGFP—N1脂质体复合体转染小鼠胚胎干细胞，经G418筛选后选取GFP强阳性克隆进行扩增建系。对稳定表达GFP的胚胎干细胞系进行畸胎瘤形成检测，观察其多向分化潜能。诱导GFP阳性胚胎干细胞向心肌细胞分化。免疫荧光及RT-PCR检测心肌细胞特异性标志物。结果 转染后胚胎干细胞经20次传代后仍然表达GFP，裸鼠皮下接种胚胎干细胞后30～50d均可形成畸胎瘤。GFP阳性胚胎干细胞成功向心肌细胞分化。结论 成功建立表达GFP的小鼠胚胎干细胞系，并可诱导其向心肌细胞分化。