金线莲炭疽病病原菌的分离鉴定及其对9种杀菌剂的敏感性

摘要

为明确金线莲炭疽病的病原菌,根据科赫法氏则采用组织分离法对采集的病叶进行了病原菌分离,确定其致病性后,结合形态学特征及基于肌动蛋白基因(actin gene-ACT)、β2微管蛋白基因(β2-tubulin gene-TUB2)、几丁质合酶基因(chitin synthase A gene-CHS-I)、磷酸甘油醛脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase gene-GAPDH)和核糖体内部转录间隔区(ITS)联合系统发育分析对该病原菌进行了鉴定,并测定了9种杀菌剂对该病原菌的离体抑菌活性。结果表明:分离得到的炭疽菌菌株在金线莲离体叶片上表现出的症状与田间自然发病症状相似,证明所分离的菌株为引起金线莲炭疽病的致病菌。根据病原菌的菌落、分生孢子及附着胞形态等初步判断其为长直孢炭疽菌Colletotrichum gigasporum;进一步基于ACT、CHS-I、GAPDH、ITS和TUB2联合系统发育分析的分子鉴定结果与形态学鉴定结果一致,确定了引起该病害的病原菌为长直孢炭疽菌。离体抑菌活性测定结果表明,咪鲜胺、戊唑醇、肟菌酯、氯苯醚酰胺、苯醚甲环唑、丙硫菌唑、氟啶胺、甲基硫菌灵和百菌清对供试病原菌的EC50值分别为0.014 5、0.240、18.2、29.9、0.114、0.402、0.019 1、2.80和38.5μg/mL,其中咪鲜胺和氟啶胺的抑菌活性最强。