发酵液中重组水蛭素的分离纯化

摘要

目的 :建立毕赤酵母 (pichia)高密度表达的重组水蛭素 (recombinanthirudin 2 ,rHV2 )分离纯化工艺。方法 :高密度培养重组毕赤酵母并诱导表达水蛭素至胞外 ,发酵液经超滤、透析、离子交换层析 ,分离纯化rHV2 目的蛋白 ;采用SDS PAGE和抗凝血酶活力分别检测目的蛋白纯度和活性。结果 :纯化样品经SDS PAGE电泳检测为单一条带 ,重组水蛭素比活性为 6 0 0 0ATU/mg ,纯化收率达 38 6 %。结论 :超滤、透析和离子交换层析可用于发酵液中大规模分离纯化重组水蛭素。