雷帕霉素对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子表达的调节

摘要

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子(nucleostemin,NS)的调节及可能机制。方法反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chine reac-tion,RT-PCR)和Western blot检测核干细胞因子(nucleostemin,NS)转录和蛋白表达,通过激酶抑制剂预处理找出可能参与RAPA调节NS的激酶;Western blot检测RAPA对此激酶活性的影响。结果 MG63细胞中RAPA在转录和蛋白表达水平均上调了NS表达。蛋白激酶B(Akt)抑制剂wortmannin预处理细胞逆转了RAPA对NS的上调作用。RAPA对Akt的总体活性无明显影响,但上调了第473位丝氨酸磷酸化Akt(phosphorylated Akt at Ser473,pAkt)的核转位。结论 RAPA可能通过增强pA-kt的核转位上调了MG63细胞中NS的表达。