牛β-酪蛋白5′端上游调控序列的克隆和序列分析

摘要

该文用PCR扩增了牛β－酪蛋白基因5′－端上游调控序列，并对其进行了克隆和序列分析。采集成年母牛肝，提取DNA。在牛β－酪蛋白基因外显子1和上游调控区内设计引物，扩增其上游调控序列。两条引物长均为19个核苷酸，引物间跨度为635bp。以牛肝DNA为模板，进行PCR扩增，扩增产物在2％琼脂糖凝胶上电泳，可见特异的目的条带。从凝胶中回收目的片段，克隆到pGEM－T载体中。重组质粒提取DNA，进行序列分析。测序结果与文献发表的类似序列相比，仅有4个碱基不同，同源性达99．4％。表明获得了牛β－酪蛋白基因5′－端上游调控序列的克隆。