同型半胱氨酸对内皮细胞一氧化氮合酶活力及基因表达的影响

摘要

目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮合酶(eNOS)活力及其基因表达的动态影响。方法10、30、100、300μmol.L-1Hcy与HUVEC分别培养24、48、72 h后,用HPLC测定细胞内不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内eNOS mRNA的表达,并分别测定细胞二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶(DDAH)、eNOS的活力和NO的含量。结果HUVEC经不同浓度Hcy分别处理24、48、72 h后,其细胞内ADMA聚积增多,DDAH活性和eNOS活力降低,NO生成减少,且呈时间和浓度依赖性。但只有100μmo.lL-1Hcy与HUVEC作用72 h时,才引起eNOS mRNA表达的减少。结论Hcy对内皮功能的损伤可能通过抑制DDAH活性,引起ADMA聚积,从而降低eNOS活力,导致NO生成减少。此外,eNOS mRNA表达的抑制也是Hcy诱导的内皮功能障碍的机制之一。