外源性TH基因在帕金森氏病鼠脑内的表达──行为和TH免疫组化的研究

摘要

用成年大鼠75只，给右侧黑质区注射6-羟基多巴胺（6－OHDA），损毁黑质多巴胶能神经元，制备偏侧帕金森氏病（PD）鼠模型。四周后，注射阿朴吗啡（APO）诱发大鼠向左侧旋转。旋转数为每分钟7次以上的35只PD鼠作实验用。其中实验组15只，对照组20只。向实验组PD鼠右侧纹状体多点植入含大鼠酪氨酸羟化酶cDNA（THcDNA）的真核表达载体pSVK3－TH和脂质体Lipofectin混合的基因转染复合体。对照组分2组，每组10只。一组PD鼠右侧纹状体只植入pSVK3－TH，另一组仅植入Lipofectin。所有实验动物在移植后的18d内，每隔3d注射APO诱发旋转。并与移植前作比较。结果是：实验组的PD鼠，在移植后的12d内旋转数比移植前明显减少，到第15天后，旋转数接近移植前水平。经TH免疫组织化学检查，在移植后6d和12d的，右侧纹状体内有TH免疫阳性细胞。主要位于移植周围。移植后18d的，未发现TH免疫阳性细胞。对照组的所有PD鼠，除其不对称旋转数与移植前比无变化外，在右侧纹状体内，也无TH阳性细胞。本研究首先证明了脂质体可介导TH基因进入PD鼠纹状体内的细胞并获得成功的表达，表达时程与功能变化时程相一致。该结果可能会为PD病人基因治疗的临床应用提供新的参考资料。