人多发性骨髓瘤耐药细胞系MOLP-2/R的建立及其耐药机制

摘要

目的建立耐马法兰的人多发性骨髓瘤细胞系MOLP-2/R,并对其生物学特性及耐药机制进行初步探讨。方法采用马法兰浓度梯度递增法,建立耐马法兰多发性骨髓瘤细胞系。检测两种细胞的形态差异、生长曲线及倍增时间;用药物敏感试验检测两种细胞对马法兰及多种化疗药物的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI);使用Western blot比较两种细胞P-gp、MRP和FANCD2的表达差异来探讨可能的耐药机制。结果成功建立了耐药指数为6.03的MOLP-2/R耐药细胞系,与MOLP-2细胞相比,MOLP-2/R耐药细胞异形明显;耐药细胞倍增时间显著延长(P<0.05);MOLP-2/R且对ADM、CTX、DDP、VP-16有交叉耐药;MOLP-2/R中FANCD2的单泛素化表达较MOLP-2明显增加,而P-gp、MRP在耐药细胞系中表达无升高。结论MOLP-2/R具有典型多药耐药特性,为进一步研究耐药逆转途径提供了实验基础。FANCD2蛋白单泛素化表达增强可能是MOLP-2/R细胞产生获得性耐药的主要机制之一。