基因工程根瘤菌表达融合蛋白GST-HAL1条件的优化及耐盐水平的提高

摘要

利用原核表达载体pGEX-4T-1构建重组质粒载体pGEX-HAL1,三亲本杂交转化根瘤菌,表达融合蛋白GST-HAL1。结果表明,与空白菌和未诱导工程根瘤菌相比,诱导后工程根瘤菌的耐盐水平有明显提高。通过检测不同温度、不同诱导时间和不同IPTG诱导浓度条件下融合蛋白的表达量,优化各个参数。在28℃的温度条件下,融合蛋白GST-HAL1表达量明显增加;在IPTG浓度为1.0 mmol.L-1,诱导时间为3 h的条件下,融合蛋白的表达量最高,培养基产生的融合蛋白为3.02 mg.L-1,占可溶性蛋白质的39.34%。本研究对今后利用基因工程技术研制新型生物肥料做了有益的尝试。