舞毒蛾ISSR反应体系的优化与建立

摘要

舞毒蛾是一种食性广、危害大的林业害虫,遗传多样性的研究有利于揭示不同地理种群的遗传变异情况。以河北舞毒蛾为实验材料,对ISSR反应体系中的5个因子(Taq DNA聚合酶、模板DNA、引物、MgCl2和dNTPs)的8个浓度梯度依次进行试验,每一因子的最佳浓度都用于下一组优化试验,最终确定最佳反应体系优化筛选,结果表明,20μL ISSR反应体系各组分的最适浓度分别为0.5 U Taq DNA聚合酶,1.5 ng/μL模板DNA,2.4μmol/L引物,1.75 mmol/L MgCl2,0.28 mmol/L dNTPs。这一优化的舞毒蛾ISSR-PCR反应体系为进一步利用ISSR分子标记技术对舞毒蛾的遗传多样性分析奠定了良好的试验基础。