环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

摘要

根据GenBank中公布的环形泰勒虫转运蛋白(Theileria annulata cargo protein)基因序列,设计1对特异性引物,用于建立环形泰勒虫转运蛋白TB Green实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法对环形泰勒虫具有特异性,与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫无交叉反应;本方法的最低检测限为10.4 copies;组内和组间的变异系数均小于5%,具有较好的稳定性。对来自10个省(自治区)的766份样品进行检测,发现该环形泰勒虫实时荧光定量PCR方法的检测敏感性高于普通PCR的。本研究中建立的环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感性高、稳定性好的特点,为检测环形泰勒虫病提供了一种快速、有效的诊断方法。