人多药耐药基因mdr1野生型mRNA转导脐血干细胞提高其对化疗耐药性的体外研究

摘要

目的:将人类多药耐药基因(mdr1)全长野生型mRNA 转导至人脐带血干细胞,分析其P糖蛋白的表达及干细胞的耐药性。方法: 通过体外转录方法经人野生型mdr1 基因全长cDNA制备相应的mRNA, 经脂质体介导转染人造血干细胞,采用RT- PCR 和Western blot 检测转染效果,流式细胞仪检测蛋白表达、体外培养及细胞活率计数观察耐药性。结果: 转染后P糖蛋白表达丰度为9 .05%,对照组为1. 01%; 转染后具有Rhodamin 123 排泌功能的细胞占98 .72%, 对照组为66. 83%;转染后细胞耐药性明显增强,P=0 .002。结论: 通过脂质体介导,将人类mdr1基因野生型全长mRNA转导入脐血干细胞,增加了P糖蛋白的表达,提高了细胞的耐药性。该系细胞可用于缓解和治疗恶性肿瘤化疗带来的骨髓抑制。