利用随机肽库鉴定猪瘟病毒E2蛋白抗原表位

摘要

利用噬菌体随机12肽库对抗猪瘟病毒(classical swine fever virus CSFV)糖蛋白E2特异的单抗A11进行表位鉴定,经过4轮筛选后,随机挑取10个噬菌体克隆作竞争ELISA检测.结果表明,10个克隆中除4号克隆外,其余9个均能抑制原核表达的E2蛋白和A11单抗之间的抗原抗体反应,抑制率在35%～64%;DNA测序表明,所有产生竞争抑制作用的8个噬菌体克隆的12肽序列均含有XXWRXXXL核心序列,而没有抑制作用的克隆则不含该核心序列;Western-blot试验证明,所挑阳性克隆均能被单抗A11识别.多序列比较发现,该核心序列与猪瘟病毒E蛋白的28～35位氨基酸TTWKEYSH有一定的同源性,人工合成的含有部分核心序列氨基酸的多肽可以与单抗A11反应,表明单抗A11所针对的抗原表位位于CSFV E2蛋白的28～35位氨基酸.